维生素测定用培养基的关键成分

微生物法测定食品中的维生素B12、叶酸是国家食品安全标准中的首选方法。因其检出限低、灵敏度高、测定结果准确可靠，受到了国际国内的广泛青睐。在该方法中要用到三种培养基：贮存菌用培养基、接种菌用培养基、维生素测定用培养基。其中维生素测定用培养基最重要，也最为关键。那么，这类维生素测定用培养基有什么特点呢？哪种成分最关键呢？

举叶酸干酪培养基为例。它里面含有硫酸亚铁、硫酸锰等微量元素，这些微量元素常常作为细菌生理酶的辅因子。培养基还含有尿嘧啶、黄嘌呤，它们参与细菌DNA的复制合成。还含有一些氨基酸，如色氨酸、天门冬酰胺，以及一些测定用菌（干酪乳杆菌ATCC 7469）所需的一切维生素，如核黄素、硫胺素等，但叶酸除外，因为叶酸需要人为的额外添加。叶酸加的多，乳杆菌就繁殖得多。通过乳杆菌繁殖的量的多少，就可以确定叶酸的含量了。

因此，在叶酸干酪培养基中，它应该含有氮源营养，如酪蛋白的酸水解产物，这些产物多半是氨基酸和多肽类的小分子。但它一定不能含有维生素。因为其他维生素都是外源添加的。所以，无维生素的酸水解酪蛋白是维生素测定用培养基的关键成分。因为一旦该水解产物有维生素，特别是叶酸，就会对实验造成干扰，给叶酸的测定带来很大的偏差。

国内有些厂家的叶酸干酪培养基，酸水解酪蛋白中的维生素祛除不彻底，特别是含有部分叶酸，造成本底较高，给叶酸测定带来很大偏差。因此，要保证测量结果的准确，一定要使用合格的质量可靠的产品。

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