超级耐药菌不动杆菌的一种分离方法

不动杆菌是一类不发酵糖类的革兰氏阴性杆菌，不动杆菌属（Acinetobacter）分为7种，即醋酸钙不动杆菌（A. calcoaceticus）、鲁菲不动杆菌（A. lwoffi）、鲍曼不动杆菌（A. baumanii）、溶血不动杆菌（A. haemolytius）、琼氏不动杆菌（A. junii）、约翰逊不动杆菌（A. johnsonii）和抗辐射不动杆菌。

不动杆菌主要存在于各类型的感染中，对大多数常用的抗生素都有耐药性，包括β内酰胺类和氨基糖甙类。不动杆菌是条件致病菌，也是人体正常菌群的组成部分。该菌粘附力极强，易在各类医用材料上粘附，而成为贮菌源。存在于健康人皮肤（25%）、咽部（7%），也存在于结膜、唾液、胃肠道及阴道分泌物中。感染源可以是患者自身（内源性感染），亦可以是不动杆菌感染者或带菌者，尤其是双手带菌的医务人员。传播途径有接触传播和空气传播。在医院里，污染的医疗器械及工作人员的手是重要的传播媒介。易感者为老年患者、早产儿和新生儿，手术创伤、严重烧伤、气管切开或插管、行静脉导管和腹膜透析者，广谱抗菌药物或免疫抑制剂应用者，免疫缺陷患者需要使用呼吸机，其感染的风险更大。根据感染部位不同和病情轻重不一，可引起呼吸道感染，创口感染、败血症等。在使用呼吸机者中，肺炎发生率约为3%～5%。

临床上检测不动杆菌主要是通过细菌培养。传统分离方法在血平板和麦康凯平板上经35℃~37℃培养18h~24h后，可形成圆形、灰白色、光滑、湿润、边缘整齐、直径2~3mm的菌落，无色素形成，存在菌落与背景区分不明显，不易分离等缺点，培养方法有尿液培养、痰液培养、咽部黏液培养等。当尿培养阳性者细菌计数应＞10万/毫升时，判定为不动杆菌感染；痰培养阳性者，每个平板的不动杆菌菌落数应在30个以上。

HiMedia公司（国际知名微生物培养基生产商）生产的HiCrome™不动杆菌显色培养基（货号M1938）用于环境和临床样本中选择性分离耐药的不动杆菌，方便快捷，显色明显。产品经过欧盟体系认证，可用于临床诊断。其特殊蛋白胨提供了氮源、碳源化合物、氨基酸、维生素和其他对生物体重要的生长因子，氯化钠可以保持渗透平衡，选择性添加剂可以抑制革兰氏阳性菌生长。培养基中的显色混合物使目标菌菌落呈淡紫色，伴有光晕。试验证实，多重耐药的鲍曼不动杆菌如ATCC BAA-1605均可被有效分离出来，而其他不耐药的不动杆菌生长被抑制。ATCC BAA-1605菌株于2006年从加拿大医院中分离，对头孢他啶、庆大霉素、替卡西林、哌拉西林、环丙沙星等多种抗生素均有耐药性。

HiCrome™不动杆菌显色培养基在配置过程中，无须高压灭菌，在冷却至45-50°C需加入两管复溶的MDR选择性添加剂（货号FD271，成分氨苄青霉素钠盐和头孢他啶）或Leeds不动杆菌选择性添加剂（货号FD335）。只需在35-37°C培养24h~48h即可得到结果。该产品有多篇国际引用文献，如2017年发表的印度锡金的转诊医院对鲍曼不动杆菌分离株β-内酰胺酶的表型分析（Uzma Rehman , Karma Gurmey Dolma , T.Shantikumar Singh. Comparative analysis of various phenotypic methods for the detection of beta-lactamase in Acinetobacter baumannii isolates from a referral hospital in Sikkim, India[J]. Indian Journal of Basic and Applied Medical Research,2017, 6(3) : 226-233）。