李斯特菌显色培养基的应用

李斯特菌属( Listeria．spp) 经常存在于各种动物和环境中，来源于土壤和水中的李斯特菌可能污染人类消费品，特别是即食食品。与其他常见致病菌相比，单核细胞增生李斯特菌的感染率虽然较低，但致死率高达 20%～50%。因此，高效精确地从食品等样品中分离和鉴别出单核细胞增生李斯特菌，对食品质量控制和疾病预防治疗有重要意义。

ISO、FDA 及我国卫生部推荐的标准方法和替代方法是用 PALCAM 和显色培养基进行检测和分离。传统的PALCAM 经过长期的应用验证，能有效地分离李斯特菌，但无法区分致病和非致病的李斯特菌，另外许多七叶苷阳性的菌也会产生一些假阳性及干扰。

近年来兴起的李斯特菌显色培养基，通常是采用属特异性β－葡萄糖苷酶和磷脂酰肌醇或胆碱酶显色技术。平板制备时对磷脂酰肌醇或胆碱配套试剂要求严格，温度过高会产生絮状物，难以观察到菌落特征，温度过低又易凝固而不能再次加热溶解。

实验过程中显色培养基的质量，直接决定实验的成败。推荐使用进口产品，HiMedia公司（国际知名微生物培养基生产商）生产的显色培养基，其他显色培养基厂家比较，HiMedia显色培养基在普通显色培养基的基础上改良，形成自己独特产品，显色效果区分明显，特异性较强，产品种类更丰富。如对于李斯特菌的检测，目前有5款产品可以选择。

产品1：单增李斯特氏菌显色培养基（货号：MV1540）

选择鉴别性分离单核细胞增生李斯特氏菌。

它的特点是可区分单增李斯特氏菌与英诺克李斯特氏菌，但无法区分单增李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌。该培养基完全符合我国食品安全检测标准GB4789.30-2016，国标首选 ALOA法。

原理：依据李斯特菌特有的β-葡糖苷酶及磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C（PIPLC）活性。

产品2：HiCrome单增李斯特氏菌鉴别琼脂基础（货号：M2009）

与货号MV1540不同的是依据李斯特菌的β-半乳糖苷酶和磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C（PCPLC活性）注：不是PIPLC

产品3：HiCrome单增李斯特氏菌快速鉴别琼脂基础（货号：M1924）

该培养基适用于快速鉴定和鉴别单增李斯特菌，并与其他李斯特菌菌种区分。

原理：除了依据 “β-葡糖苷酶”、和“PIPLC活性”外，增加了“鼠李糖发酵”的检测，从而对绵羊李斯特菌（伊氏李斯特氏菌）、英诺克李斯特菌和单增李斯特氏菌三者能够进行区分。

产品4：单增李斯特氏菌验证琼脂基础（MV1552）

用于从临床和食品样本选择性分离鉴别单核细胞增生李斯特菌。

原理：依据PIPLC活性和α-甲基-D-甘露糖苷的发酵。

它不是显色培养基，但能区分单增李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌。

产品5：HiCrome李斯特氏菌琼脂基础（M1417，M1417F）

从食品和临床样本中快速选择、鉴别、鉴定李斯特菌。

M1417、M1417F均能鉴别出李斯特菌。此外，M1417还能鉴别是否发酵鼠李糖，M1417F能鉴别是否发酵木糖，因而能区分伊氏和单增。

实验过程中，可以根据具体的需求进行选择，HiMedia公司生产的显色培养基与传统培养基相比，克服了传统培养基在各种细菌分离、鉴别、计数等操作过程中比较复杂（需要有经验的技术人员）、耗时较长、敏感性低和特异性差的缺点。

Himedia显色培养基在检测细菌时，通常培养24小时通过观察菌落颜色即能用肉眼对细菌进行定性或定量分析，既缩短了检测时间，减少了生化鉴定的过程，极大提高工作效率。

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