常用的几种生理生化鉴定实验

大分子物质水解反应

生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶只要为水解酶，通过加水裂解大的物质为较小的化合物，使其能被运输至细胞内。

淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖；脂肪酶水解脂肪为甘油和脂肪酸；蛋白酶水解蛋白质为氨基酸等。这些过程均可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实；淀粉遇碘液会产生蓝色，但细菌水解淀粉的区域，用碘测定不在产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。脂肪水解后产生脂肪酸可改变培养基的pH，使pH降低，加入培养基的中性红指示剂会使培养基从淡红色变成深红色，说明胞外存在着脂肪酶。

糖发酵试验

糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。有些细菌能分解某种糖产生有机酸（如乳糖、醋酸、丙酸等）和气体（如氢气、甲烷、二氧化碳的等）；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。

发酵培养基含有蛋白胨，指示剂（溴甲酚紫），倒置的德汉氏小管和不同的糖类。当发酵产酸时，溴甲酚紫指示剂可由紫色（pH6.8）变为黄色（pH5.2）。气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。

IMViC反应

IMViC反应是吲哚试验、甲基红试验、伏-普试验和柠檬酸试验4个试验的首字母缩写。这四个实验主要是用来快速鉴别大肠杆菌和产气杆菌，多用于水的细菌检查。

吲哚试验：某些细菌有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸形成吲哚（靛基质），吲哚能与对二甲基氨基苯甲醛作用生成玫瑰吲哚而呈红色。

甲基红试验：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步被分解成为甲酸、乙酸、琥珀酸等，使培养基pH下降至4.5以下，加入甲基红指示剂可呈红色。如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其他物质（如醇、醛、酮、气体和水），培养基pH在5.4以上，加入甲基红指示剂呈橘黄色。本试验常与V-P试验一起使用，因为前者呈阳性的细菌，后者通常为阴性。

伏-普（二乙酰）试验：某些细菌能发生如下转换：葡萄糖→丙酮酸（脱羧）→乙酰甲基甲醇→2，3—丁烯二醇，在有碱存在时氧化成二乙酰，后者和胨中的胍基化合物起作用产生粉红色的化合物。本试验目的在于测定细菌产生乙酰甲基甲醇的能力。

柠檬酸试验：当细菌利用铵盐作为**氮源，并利用柠檬酸盐作为**碳源时，若细菌能利用这些盐作为氮源和碳源而生长，则能利用柠檬酸钠产生碳酸盐，从而与利用铵盐产生的氨反应，形成NH4OH，使培养基呈碱性，使指示剂溴麝香草酚蓝（BTB）由淡绿转为深蓝。

生化反应种类繁多，操作复杂过程繁琐，耗时较长，现市面上已出现生理生化反应试剂盒，但市面上试剂盒产品鱼目混杂，质量难以保证，那么如何选择一款高品质，操作简单，结果准确的鉴定试剂盒呢？

缔一生物为您推荐一款进口产品——由HiMedia公司（国际知名微生物公司）生产的HiBio-ID™系列微生物生化鉴定卡。

一个生化鉴定卡上集成了12种或24种生化试验，细菌实验包括IMViC试验 ：吲哚（I）、甲基红（M）、VP（V）、柠檬酸盐利用（C）四种试验常用于鉴定肠道杆菌，合称为IMViC试验、碳水化合物代谢实验、氨基酸代谢实验、苯丙氨酸脱氨基实验（丙氨酸脱氨酶实验）

、尿素代谢实验（尿素分解酶实验）、丙二酸盐代谢实验、ONPG实验（β-半乳糖苷酶实验 ）

、葡萄糖醛酸酶检测实验、硝酸盐还原实验、七叶灵水解实验、硫化氢产生实验、运动性检测实验、过氧化氢酶实验（触酶实验）、氧化酶实验、耐盐实验、吡咯烷酮酶实验（PYR实验）、碱性磷酸酶实验。

    鉴定卡的选择依赖于各种因素，如在选择性鉴别琼脂上的生长状况、生长时间、菌落特征、革兰氏染色染色等。 HiBio-ID™系列微生物生化鉴定卡操作简单，节省大量实验试剂配制时间，所有所需试剂都包含在试剂盒中（如包含触酶试验需自己制备双氧水，因双氧水不稳定），且无需其它仪器，人工就可读取，高效率，一次孵育即出结果，实验结果准确、可靠。

缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商，在微生物培养和检测领域，会一如既往地为您带来优质的服务。如想了解更多信息可访问公司官网：http://www.viansaga.com/ ；咨询电话：400-166-8600。