Vero细胞的来源及优势介绍

近年来随着生物技术的发展，动物细胞培养技术已从简单的试验研究拓展到了生物学研究和商业应用领域。生物制品如生物基因工程疫苗、病毒性疫苗、医学治疗性抗体的研究与生产都用到了细胞培养技术。应用较广泛较安全的动物细胞基质是Vero细胞。Vero细胞是世界卫生组织(WHO)和《中国药典》认可的疫苗生产细胞系。

Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)是日本学者Yasumura和Kawakita两人在1962年正式从非洲绿猴肾脏分离的，初次用于生产人用生物制品的异倍体贴附依赖性细胞，并建立了细胞系和不同代次的细胞库。在此之前，对生物制品的研究和生产只允许用原代细胞或二倍体细胞。

二倍体细胞系传代次数有限，当传代达到一定代次后就会衰老凋亡，致使生产工艺无法投入到规模化生产。长久以来，人们对将传代细胞作为生物制品生产基质的考虑和应用很少，因检测手段有限，对其致瘤性和外源性污染等特性研究不清楚，直到1987年，WHO才正式批准传代细胞系作为生物制品生产的基质。

Vero细胞被批准用于人用疫苗的生产后，开始生产的人用疫苗是Barrett等[1]生产的脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)，之后Vero细胞用于狂犬病毒疫苗和口服脊髓灰质炎病毒疫苗(OPV)等多种人用疫苗生产。Vero细胞在病毒性疫苗生产的应用已有30年之久，尤其是狂犬病毒疫苗和脊髓灰质炎疫苗。

Vero细胞系广泛应用于人用疫苗的生产是基于其独特的特性。Vero细胞因其固有的基因缺陷，不能表达抗病毒蛋白干扰素。Barrett等[1]试图用新城疫病毒、仙台病毒、风疹病毒感染Vero细胞生产干扰素，结果表明Vero细胞不能表达分泌干扰素蛋白。然而，在相同条件下，改用BSC-1细胞和其他灵长类动物细胞重复这一实验时，这些细胞系可以表达分泌大量干扰素蛋白。有文献报道，Vero细胞可能存在β和α基因的缺陷，不能表达干扰素蛋白[2]。Vero细胞的广泛易感特性促进了使用Vero细胞生产疫苗事业的发展。

除了以上优势，与生产生物制品生产用原代细胞系和二倍体细胞系相比，Vero细胞还具有以下优势：

一、来源方便，容易建立细胞库和保存，可连续传代，生长速度快；

二、Vero细胞遗传性状稳定，恶性化概率小，无外源性污染，具有良好的生物安全特性；

三、Vero细胞对多种病毒敏感，生产的病毒滴度高；

四、Vero细胞对培养条件要求不高，在微载体表面能良好的贴附生长，易在生物反应器放大培养。

培养基的质量直接关系到疫苗的品质。目前用于Vero细胞的培养基主要有M199、MEM、DMEM等合成培养基。近有报道，HiMedia公司生产的SFRE 199培养基（SFRE 199是在基础培养基M199的基础上改良的）也可用于Vero细胞的无血清培养[3]。如下图所示，分别用添加水解乳蛋白的F-12和SFRE 199-1培养Vero细胞，结果显示Vero细胞在无血清的SFRE199-1中生长状态良好。

参考文献

［1］ Barrett PN，Mundt W，Kistner O，et al． Vero cell platform in vaccine production: moving towards cell culture-based virul vaccines［J］． Expert Ｒev Vaccines，2009，8(5) ，607-618．

［2］ 吴雪伶，袁宝珠． 干扰素系统的完整性与 Vero 细胞病毒敏感性的相关性［C］/ /2012 年中国药学大会暨第十二届中国药师周论文集． 北京: 中国药学会，2012．

［3］ Jack Litwin.The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. State Bacteriology Laboratory, 105 21 Stockholm, Sweden.

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