采血年龄对牛血清性能的影响

牛血清是细胞培养基的重要组成部分，其质量好坏对细胞状态及数量增长速度影响很大。常用的有胎牛血清、新生牛血清及小牛血清。牛的采血年龄是这三种血清区分的显著标志。小牛血清的采集对象是出生1年之内的小牛，新生牛血清是出生24小时至2周内的新生牛，胎牛血清则是6-10个月的胎牛。随着采血年龄的增加，牛血清中的生长因子减少，抗体和补体等含量增加。因此，鉴别血清原料的采血年龄段，防止成牛血清的参入是血清品质检测者所面临的一个重要问题。

有研究人员通过不同年龄段的牛血清在不同浓度下对SP2/0细胞株培养效果的比较试验，用**增殖浓度、倍增时间、克隆率等指标来推断样品血清的采血年龄段，其结果如下：

SP2/0细胞株为鼠骨髓瘤细胞。首先，研究人员在无菌条件下，将7个供试血清0.22μm过滤除菌，然后将供试血清按10％、8％、6％、4％、2％的浓度分别加到MEM培养基稀释好的细胞悬液中使细胞浓度为1×104／ml。充分混匀后在96孔细胞培养板中每孔接种0.2ml，每个试验样接种8孔。每24 h记数一孔，共记数7d。研究人员又将供试血清按8％的血清浓度加到MEM培养基稀释好的细胞悬液中，将SP2／0细胞稀释到5个／mL，分别接种到96孔细胞培养板中，每孔0.2mL，每个供试血清样品接种48孔，一周后计数克隆生成孔数。

结果显示，在克隆率方面，采血年龄越小，效果越好，胎牛血清培养的细胞克隆率为85.4%，6h新生牛血清为79.1%，6月龄小牛血清为50%。在促细胞生长效应方面，随着血清浓度从2%提高到10%，细胞**增殖数不断升高，倍增时间缩短。血清浓度相同时，采血年龄约越小，细胞数最高，倍增时间越短。不同年龄段的牛血清对促细胞生长效应的影响呈现比较明显的差异性。

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上海威正翔禹生物公司提供的Ausbian精制新生牛血清（货号：VS500N）为澳洲进口，血源来自新西兰出生在4天内的新生牛。血清经过严格质控，如检测总蛋白、支原体、牛病毒性腹泻病毒、牛副流感病毒等，并经0.22m过滤和gamma射线照射，指标达标，经广泛使用，受到好评。

参考文献

李倬，等.促细胞生长效应试验对牛血清采血年龄段判定的探讨.西北民族大学学报.2003,24(3):59-66