动物细胞的灌注培养

动物细胞的培养技术自上世纪初出现以来，经历了一个多世纪的发展，获得了很大的进步。不仅建立了许多细胞系和培养了许多类型的原代细胞，而且开发了人工合成培养基和无血清培养基，并且出现了细胞工程，哺乳动物细胞的大规模培养获得了工业化的应用，用于生产重组蛋白、单克隆抗体等生物药、载体病毒、病毒性疫苗等。开发了微载体、中空纤维管和生物反应器等，并且实现了一种不同以往的培养方式——灌注培养。目前，灌注培养已成为高产率培养细胞的主要方法。

灌注培养是一种动态培养，可提供不断流动的培养液和消除有害的代谢产物。它包括蠕动泵、热板、组织载体、气体扩张器、配套的培养瓶和管子。蠕动泵用于控制通过培养箱的培养液流速。热板向培养箱提供37 ℃的维持温度。气体扩张器用于消除管道中的气泡。

灌注培养有四个特点：一是能及时地补充营养物质和排出代谢产物，有利于细胞的扩增，实现高密度培养；二是提供稳定的环境，有利于细胞的持续增殖；三是可实现梯度培养，如梯度培养箱的腔面和基底面分别用不同的培养液灌注，更接近体内环境，可用于体外三维组织工程的构建。四是灌注培养检测废液中葡萄糖和乳酸浓度，进而更清楚当前细胞培养微环境情况。

在组织工程上的实践显示，灌注培养有利于体外高活性有功能软骨组织工程的构建。灌注培养得到的DN A和糖胺聚糖的含量明显增高，比用静态培养的含量多。

灌注培养可用含血清的培养基。但无血清培养基已成为发展的趋势。只是无血清开发成本高，应用范围窄，尚未全部替代含血清培养基。

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参考文献

唐光霞, 陈建苏. 灌注动物细胞培养及其在组织工程中的应用进展.眼科新进展.2010,30(5):486-491