疫苗生产与无血清培养基

传统疫苗生产是采用含新生牛或小牛血清的培养基。含血清培养基有其优点，但也有其缺点，可归纳如下：

1. 过敏问题。最后产品即使有很微量的天然成分，也可以引起过敏反应和其他不安全问题。

2. 病毒问题。血清可能有带入病毒的污染，而病毒无法用过滤的方法去除。钴60γ射线照射可以去除支原体和病毒，但低剂量时对病毒去除得不完全，高剂量时又会对血清造成破坏，影响细胞生长。

3. 血清存在批间差异，疫苗质量难以控制。

4. 供应量受限。

5. 纯化难度高。

6. 成分复杂，可能负向影响细胞在微载体的贴附效果。

因此后来出现了无血清或无蛋白、化学成分完全明确的培养基。HiMedia公司近日推出PK-15细胞无血清培养基（货号SFM035）和MRC-5细胞无血清培养基（货号SFM034），分别用于兽用疫苗和人用疫苗的生产。

SFM035既是无血清培养基，也是无动物源性成分化学限定培养基，不含谷氨酰胺和碳酸氢钠。SFM035包含基础培养基（干粉）和生长添加剂。细胞在转为无血清培养基，应当进行逐步适应，可按75%、50%、25%、10%、5%、1%逐步降低血清的浓度。当细胞到达100％无血清培养这一步时，如果细胞在4-6天内获得细胞密度为1.5-2.0×10⁶个细胞/ ml，这时即可认为细胞已适应无血清培养条件。

SFM035促细胞生长的实际效果见下图。SFM035培养7天后，细胞密度显著增加，并显著高于竞品。

细胞传代的实验显示，细胞传代5次，每次细胞密度均较稳定，没有显著起伏。