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疫苗生产与无血清培养基

2019-06-21 09:25来源:威正翔禹|缔一生物

传统疫苗生产是采用含新生牛或小牛血清的培养基。含血清培养基有其优点,但也有其缺点,可归纳如下:

1. 过敏问题。最后产品即使有很微量的天然成分,也可以引起过敏反应和其他不安全问题。

2. 病毒问题。血清可能有带入病毒的污染,而病毒无法用过滤的方法去除。钴60γ射线照射可以去除支原体和病毒,但低剂量时对病毒去除得不完全,高剂量时又会对血清造成破坏,影响细胞生长。

3. 血清存在批间差异,疫苗质量难以控制。

4. 供应量受限。

5. 纯化难度高。

6. 成分复杂,可能负向影响细胞在微载体的贴附效果。

因此后来出现了无血清或无蛋白、化学成分完全明确的培养基。HiMedia公司近日推出PK-15细胞无血清培养基(货号SFM035)和MRC-5细胞无血清培养基(货号SFM034),分别用于兽用疫苗和人用疫苗的生产。

SFM035既是无血清培养基,也是无动物源性成分化学限定培养基,不含谷氨酰胺和碳酸氢钠。SFM035包含基础培养基(干粉)和生长添加剂。细胞在转为无血清培养基,应当进行逐步适应,可按75%50%25%10%5%1%逐步降低血清的浓度。当细胞到达100%无血清培养这一步时,如果细胞在4-6天内获得细胞密度为1.5-2.0×106个细胞/ ml,这时即可认为细胞已适应无血清培养条件。

SFM035促细胞生长的实际效果见下图。SFM035培养7天后,细胞密度显著增加,并显著高于竞品。

20190621

细胞传代的实验显示,细胞传代5次,每次细胞密度均较稳定,没有显著起伏。

20190621