梭菌显色培养基的应用

产气荚膜梭菌( Clostridium perfringens) 是一种革兰阳性厌氧菌，能够引起食物中毒和坏死性肠炎等疾病。该菌是临床上气性坏疽病原菌中最常见的一种梭菌，在体内能形成荚膜，能分解肌肉和结缔组织中的糖，产生大量气体，从而导致组织严重气肿，继而影响血液供应，造成组织大面积坏死。美国疾病预防控制中心数据显示，产气荚膜梭菌已成为继弯曲菌和沙门菌之后的又一大引起细菌性食物中毒的常见致病菌。

产气荚膜梭菌也是一种重要的饮用水指示菌，我国《食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》GB8538—2016规定，天然矿泉水产品和水源水中必须检测产气荚膜梭菌。

目前国内对产气荚膜梭菌的检测主要利用的是传统的生化培养方法，如利用液体硫乙醇酸盐培养基(FT)、亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础 (SPS)以及胰䏡-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础(TSC)进行分离培养，步骤较多且需要大量复杂的确认实验，整个过程至少需要 4天时间，不利于检测部门及时报告结果 ，严重影响产气荚膜梭菌检测的效率及准确性。

梭菌显色培养基（货号：M2026，HiCrome™ Clostridial Agar Base）【需添加剂：产气荚膜杆菌添加剂II（货号：FD012，Perfringens Supplement II）】根据该菌产生特异性酶，从而快速对产气荚膜梭菌进行定性和定量分析。与传统培养基相比，产气荚膜梭菌显色培养基具有更高的准确性和更快的检测速度，厌氧条件下35-37℃孵育24-48小时，即可观察接种反应（如下图）。产气荚膜梭菌显色培养基利用该菌产生特异性酶，其特异性和灵敏度均较高，在初级分离中就可以对产气荚膜梭菌进行分离与鉴定。

培养基中的胰蛋白胨提供必需的营养素，主要是氮源化合物。酵母提取物作为B族维生素的来源。葡萄糖是可发酵的碳水化合物。硫乙醇酸钠是还原剂，有助于产生低氧还电位，从而促进梭菌的生长。此外，培养基通过添加额外成分，能很好地支持梭菌属的繁茂生长。而选择性添加剂可以抑制其他肠道细菌生长繁殖。

接种梭菌琼脂的理想方法是用样品（在管中）直接接种在无菌冷却的培养基上，或者划线接种。

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