Himedia新款CCA显色培养基

大肠杆菌（Escherichia coli），又叫大肠埃希氏菌，是动物肠道中的正常寄居菌。大肠杆菌中的小部分是条件致病菌，在一定条件下可以引起人和多种动物发生胃肠道感染或尿道等多种局部组织器官感染，还会引起关节炎、脑膜炎以及败血型感染等。

大肠菌群指的是需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。

大肠杆菌与大肠菌群常被用作检验水质的指示菌。大肠杆菌随粪便排出体外；大肠菌群不仅生活在人的肠道，也生活在土壤和地表水中。因此，将大肠杆菌与大肠菌群共同作为指示菌，既可以评价水样中的粪便污染程度，也可以评价水在净化、储存、运输等环节中存在的安全问题。

我国《生活饮用水标准》（GB/T 5750.12-2006）、《畜禽饮用水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》（NY/T 1665-2008）提出了使用酶底物法检测水质中的总大肠菌群和大肠埃希氏菌，并提到“可选用市售商品化制品，以此计数来检测水中总大肠菌群”。

《国际标准 地表水和废水中大肠杆菌和大肠杆菌类细菌的检测与计数》 （ISO9308-1.2014）采用的是滤膜法联合CCA显色培养基法，用于水中大肠杆菌和大肠菌群的计数。该方法得出结果的时间更短，而且无须额外的培养基进行验证试验。但是，该方法最适合菌落数小于100的水样，如：饮用水、自来水、消毒的池水，并不适用于地表水和井水。

据ISO资料显示：CCA培养基的灵敏度为94%（大肠杆菌）和91%（大肠菌群），特异性为97%（大肠杆菌）和94%（大肠菌群），性能较好。而HiMedia公司提供的新一款CCA显色培养基，批间差异极小，批次结果稳定，重复性和准确度进一步提升。

Himedia公司生产的CCA显色培养基（货号：M1991AI，品名：HiChrome™ Chromogenic Coliform Ager w/1%Agar）推荐用于检测水样和临床样本中的大肠杆菌和大肠菌群（如水、污水、尿液等）。该培养基成分和性能符合ISO 9308-1:2014标准。

本品为选择性培养基，在M1991I的基础上做了改进，可从水样中同时检测大肠杆菌和大肠菌群（1）。其中，胰蛋白胨、丙酮酸钠和山梨醇为生物体提供氮源物质、可发酵的碳水化合物和其他必需的生长营养素。磷酸盐提供缓冲能力。该培养基配方甚至可以帮助半致死受伤的大肠菌群恢复并迅速生长。Tergitol-7抑制革兰氏阳性菌和某些大肠菌群之外的革兰氏阴性菌。

M1991AI含有三种显色底物。大肠菌群产生的ß-D-半乳糖苷酶裂解6-氯-3-吲哚氧基-β-D-吡喃半乳糖苷，产生粉红色菌落。大肠杆菌产生的β-D葡萄糖醛酸酶裂解5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡糖醛酸环己胺铵盐（2）。大肠杆菌为β-半乳糖苷酶和β-D葡萄糖醛酸酶双阳性，因而菌落呈深蓝至紫色（图1）。第三种显色原IPTG用于增强显色反应。

图1. HiCrome^TM CCA显色培养基，大肠杆菌呈深蓝至紫色，大肠菌群呈粉红色

该培养基接种时可采用平板倾注或表面涂布技术。也可采用薄膜过滤法。要确证大肠杆菌，可在深蓝色至紫色菌落上加入一滴Kovacs试剂，出现樱桃红的颜色表明为阳性反应。

参考文献                                   

1. Jorgensen, J.H., Pfaller , M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.

2.International Organization for Standardization. Water quality: Enumeration of E.coli and coliform bacteria. Part I-Membrane filtration methods for bacteria with low bacterial background flora. ISO 9308-1:2014.

HiMedia公司是国际知名微生物产品生产商，一直致力于微生物培养和鉴定产品的研发和生产，并具有WHO-GMP认证、ISO9001，ISO13485认证，CE和FDA注册登记。其产品已行销全球140多个国家。

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