植物蛋白胨在细胞无血清培养中的应用

由于TSE和其他动物病毒的存在，替代改用非动物源材料逐渐成为药厂的趋势。其中，植物源蛋白胨越来越得到广泛的应用。它作为营养成分，不仅可用于微生物的培养，而且可用于生产细胞无血清培养基的开发。

早在2004年，比利时的研究机构就发现，植物蛋白水解物支持CHO-320细胞的增殖和重组干扰素的表达1。

他们在已开发的无蛋白成分的培养基基础上，添加一些植物蛋白水解物，发现整体培养基的性能即可达到含血清培养基的水平。研究人员发现，在添加了燕麦蛋白水解物的无蛋白培养基中，微载体悬浮CHO-320细胞，细胞在生物反应器中分泌重组的干扰素γ提高了60%，**细胞密度升高了25%（和无添加其他成分的无蛋白成分培养基比较）。

在另一个小规模的灌流系统中，CHO-320细胞在纤维微载体表面和内部培养，研究人员发现大米蛋白水解物能刺激重组IFN-r的分泌升高到30%(和对照组比较）。在生物反应器中也得到了相似的结果。但在摇瓶中培养时，微载体内存在着营养、氧气和毒性代谢产物浓度梯度的局限。但随着灌流速率的增加，葡萄糖浓度维持高于5.5mM，溶解氧为60%时，持续此状态培养160小时，即能刺激IFN-γ的生成水平达到6.6μg/h/g微载体，细胞密度达到4X108细胞/g微载体。

研究人员认为，植物蛋白胨可作为廉价的血清部分替代物，同时保证了生物安全性。该研究中同时公布了使用的无蛋白成分培养基的配方。5:5:1 (v:v:v) 比例混合Iscove’s MDM, Ham’s F12和NCTC 135培养基，进一步添加谷氨酰胺到6mM终浓度，以及32.5mM NaHCO3，60μM乙醇胺，从而构成了基础培养基（BDM）。

要悬浮培养CHO细胞，BDM中进一步添加了0.1% pluronic F68，0.04pM亚硒酸钠和500μM的柠檬酸铁（铁和柠檬酸1:1），从而最终构成了无蛋白成分培养基（PFS）。之后，即向PFS中添加了上述两种植物蛋白水解物。

作者认为，植物蛋白水解物刺激细胞生长和分泌，不单单是因为营养成分，很可能是因为其中多肽成分能和细胞表面的受体相互作用，从而发生效应。

HiMedia公司是国际知名的培养基生产商，在全球率先开发有一系列的植物蛋白水解产品（HiVeg标识），这些植物蛋白来源包括玉米、豌豆、大豆、小麦、大米、燕麦、棉籽等。其中，细胞培养级的非动物源水解物有酵母粉、燕麦水解物、大豆蛋白胨、棉花水解物、乳清蛋白水解物（货号TC733）等，出厂前均经细胞培养测试，确保质量。

HiMedia公司具有WHO-GMP认证、ISO9001，ISO13485国际质量体系认证，以及产品的CE和FDA注册登记。其产品已行销全球140多个国家。

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参考文献

J.S. Ballez, J. Mols, C. Burteau, S.N. Agathos, Y.J.Schneider. Recombinant IFN-c production in suspension and inside microcarriers in protein-free media. Cytotechnology.2004,44:103-114