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支原体筛查用 qPCR检测试剂盒

2020-09-28 14:04来源：威正翔禹|缔一生物

细胞培养时，支原体污染是一个常见的问题，它会带来如下危害。

由于支原体污染无法肉眼识别，因此应定期采用试剂盒对细胞培养物中的支原体进行监测。


世界**微生物控制公司Minerva Biolabs开发有Venor® Gem系列的支原体检测试剂盒（核酸法），灵敏度高，特异性好，广受科研和工业用户的欢迎。


其中，Venor®Gem qOneStep，即支原体荧光定量PCR检测试剂盒(一步法)适用于细胞培养物、细胞培养基及其他生物基质中的支原体污染的筛查（非放行检测）。


和PCR比起来，qPCR无需跑电泳，使用时更为便捷，对实验人员更安全。


现对该试剂盒作一简单介绍:

一、产品信息

二、产品描述

试剂盒包含有1管预混液。预混液内含引物对、核苷酸、内控对照和聚合酶。另含有1管阳性对照DNA。两管均为冻干粉，使用时复溶即可。整个qPCR检测小于3小时。


三、产品特点

①内控对照已加在预混液中，无需另外配制，使用便捷。

②高特异性，一次检测即可涵盖所有常见易感染细胞的支原体物种（包括欧洲药典规定的9种支原体）。与细菌和真核DNA无交叉反应。

③高灵敏度，至少50个基因组拷贝/反应。


四、操作步骤


第1步：样本处理

第2步：试剂制备

第3步：qPCR体系建立

第4步：启动qPCR反应

第5步：结果判别

FAM通道：检测支原体荧光信号。

HEX通道：检测内控对照荧光信号。

支原体DNA和内控DNA存在信号的竞争性抑制。

支原体DNA越多，FAM通道信号越高，检测内控对照的HEX通道信号越低。

定量需基于Ct值和DNA标准曲线。

Ct＜40为阳性结果。Ct≥40为阴性结果。

示意图：