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支原体检测系列——德国MB产品综述（一）

2020-10-29 14:35来源：威正翔禹|缔一生物

支原体放行检测，在临床相关的项目中非常重要，例如：干细胞治疗项目、免疫细胞治疗项目、CAR-T项目、抗体药生产、疫苗生产，另外还有一些重要的细胞培养，细胞典藏项目，都需要对培养的细胞或收获的产物，完成准确的支原体检测，以确保产物没有支原体污染。


工作要求

使用的支原体检测方法和产品，需要能达到：

结果准确，操作简便，出结果快，

需要时，还能完成方法学验证。

确有必要，有些方法还能符合各国《药典》的要求。


当你在全球范围内浏览了无数关于支原体的文章和介绍后，你会有一个有趣的发现：

最终引起大家兴趣的文章，大多指向了德国的同一家公司，名叫：Minerva Biolabs，简称MB公司。


他只专注地研发和生产支原体和军团菌产品，使得不但MB的品牌在欧洲广为流传，而且全球能数出来的若干大品牌的支原体产品，大多也都是由这家生产后贴牌出来的。他位于德国柏林的郊外，已经在这里静悄悄地工作了几十个年头。


中国缔一生物公司在2008年率先把MB的源头产品引入中国，在过去的十几年里，MB的产品已经为为中国的疫苗生产、干细胞治疗、以及“少数民族细胞典藏”、“世界**细胞典藏”等重要项目，提供了有力的支持和帮助。


以下小编会在两个系列文章中，把MB公司关于支原体检测和支原体祛除的不同产品，以通览的形式介绍给大家，希望对中国的生物科研和质检人员，能有所帮助。


德国MB产品综述（一）

——支原体检测系列

这篇文章分为以下四个部分：

一、支原体检测试剂盒

（一）常规PCR方法

（二）荧光定量PCR方法

二、支原体DNA提取试剂盒

三、方法验证用支原体标准品

（一）灵敏度验证用标准品

（二）支原体基因组DNA（拷贝数已标定）

（三）支原体基因组DNA（特异性验证用）

四、方法验证辅助产品

具体详情如下：

一、支原体检测试剂盒

（一）常规PCR方法


品名

用途说明

货号/规格

1.支原体常规PCR检测试剂盒（一步法）

1）适合科研单位检测，或单位内检，用PCR法检测细胞或其他生物基质。

2) 比药典操作标准合并了一步，（将内控对照试剂预先混合在PCR mix试剂中），操作更简洁。

3)样本量为2μl，灵敏度为20个基因组拷贝/反应。结果准确。

11-8025

25Tests/盒

11-8050

50Tests/盒

11-8100

100Tests/盒

11-8250

250Tests/盒

2.支原体常规PCR检测试剂盒（经典法，不含Taq酶）


1) 符合欧洲药典、中国药典要求，更适合细胞治疗，CAR-T，抗体药、疫苗等临床项目申报和质检。

2）样本需先做DNA抽提。抽提后样本加入量为10μl。

3）试剂盒中不含Taq酶，需另外购买。

4) 厂家可协助完善方法验证步骤。

11-1025

25Tests/盒

11-1050

50Tests/盒

11-1100

100Tests/盒

11-1250

250Tests/盒

3.支原体常规PCR检测试剂盒（经典法，含Taq酶）

1) 符合欧洲药典、中国药典要求，更适合细胞治疗，CAR-T，抗体药、疫苗等临床项目申报和质检。

2）样本需先做DNA抽提。抽提后样本加入量为10μl。

3）试剂盒中含Taq酶，无需另外购买。

4) 厂家可协助完善方法验证步骤。

11-1025G

25Tests/盒

11-1050G

50Tests/盒

11-1100G

100Tests/盒

11-1250G

250Tests/盒

4.支原体常规PCR检测试剂盒（预分装法）

1）适合科研单位检测，或单位内检，用PCR法检测细胞或其他生物基质。

2) 比一步法更为方便。表现在：

① PCR组分（包括酶、核苷酸、引物、内控对照，均为冻干粉）和上样缓冲液/染料已预先分装在八连管中。

② PCR结束后，产物直接上胶，不需再加上样缓冲液和染料。

3)价格比一步法略高。适合想节省时间、追求简易的用户。

11-7024

24Tests/盒

11-7048

48Tests/盒

11-7096

96Tests/盒

11-7240

240Tests/盒



荧光定量PCR(qPCR)方法


品名

用途说明

货号/规格

1.支原体荧光定量PCR(qPCR)检测试剂盒

（经典法）

1) 符合欧洲药典、中国药典要求，更适合细胞治疗，CAR-T，抗体药、疫苗等临床项目申报和质检。

2）样本需先做DNA抽提。抽提后样本加入量为10μl。

3) 厂家可协助完善方法验证步骤。

11-9025

25Tests/盒

11-9100

100Tests/盒

11-9250

250Tests/盒

2.支原体荧光定量PCR(qPCR)检测试剂盒（一步法）

1）适合科研单位检测，或单位内检，用荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞或其他生物基质。

2) 比药典操作标准合并了一步，（将内控对照试剂预先混合在PCR mix试剂中），操作更简洁。

3)样本量为2μl，灵敏度为50个基因组拷贝/反应。结果准确。

11-91025

25Tests/盒

11-91100

100Tests/盒

11-91250

250Tests/盒



支原体DNA提取试剂盒


品名

用途说明

货号/规格

支原体DNA提取试剂盒

1）遵循药典标准的支原体检查、或样本中存在PCR抑制剂时，必须进行支原体DNA抽提。

2）研究领域细胞上清中的支原体检查不需要DNA抽提。

56-1010

10Tests/盒

56-1050

50Tests/盒

56-1200

200Tests/盒



方法验证用支原体标准品（替代药典方法需要验证）

灵敏度验证用标准品


品名

用途说明

货号/规格

10CFU™灵敏度标准品单品

（详见注解①）

为灭活支原体菌株，用于核酸检测法（PCR和qPCR）的灵敏度和耐用性验证。

欧洲药典要求，如替代培养法，检测限需达到10CFU/ml。

102开头

标准品3管+阴性对照2管/盒

10CFU™灵敏度标准品套装（9种支原体）

（详见注解①）


102-0002

标准品2管+阴性对照2管/盒

100CFU™灵敏度标准品

（详见注解①）

为灭活支原体菌株，用于支原体核酸检测法（PCR和qPCR）的灵敏度和耐用性验证。

欧洲药典要求，如替代指示细胞培养法，检测限需达到100CFU/ml。

103开头

标准品3管+阴性对照2管/盒


支原体基因组DNA（拷贝数已标定）


品名

用途说明

货号/规格

PCR绝对定量标准品

（详见注解①）

从支原体中提取的基因组DNA并进行精准定量。梯度稀释后，用于支原体核酸检测法（PCR和qPCR）标准曲线绘制和检测限的确定。

52开头

1×108拷贝/管 + 缓冲液3管/盒


支原体基因组DNA（特异性验证用）


品名

用途说明

货号/规格

支原体基因组DNA（特异性验证用）

（详见注解②）

从支原体中提取的基因组DNA并进行粗略定量，用于支原体核酸检测法（PCR和qPCR）的特异性验证，可作为阳性对照。

51开头

1管标准品（≈10ng）+ 1管缓冲液/盒


方法验证辅助产品


品名

用途说明

货号/规格

内控对照（PCR经典法用）

当MB试剂盒原有内控对照不够用，或其他核酸检测法需要验证时，可使用内控对照。可加到PCR或qPCR反应体系中。也可加到支原体DNA抽提的样本中，以验证DNA抽提过程。

11-1905

4管/盒

内控对照（qPCR经典法用）


11-9905

4管/盒



*注解①

单品如下：

精氨酸支原体

口腔支原体

鸡败血支原体

肺炎支原体

关节液支原体

发酵支原体

猪鼻支原体

莱氏无胆甾原体

柠檬螺原体

唾液支原体（套装不含此单品）


注解②

单品如下：

精氨酸支原   

发酵支原体   

生殖支原体

猪鼻支原体

渗透支原体

关节液支原体

关节炎支原体

鸡毒支原体

人型支原体

口腔支原体

肺炎支原体

柠檬螺旋原体

解脲支原体


需要了解更多信息，

可以联系本文发布作者，

欢迎生物同道中人，

一起探讨，共同进步！

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