胎牛血清中的外泌体参与细胞的增殖

外泌体（Exosome）是近年研究的热点，它是新发现的一种细胞通讯的形式。外形上看，它是30-150nm的小囊泡，里面却携带着多种蛋白质、RNA和脂类等重要信息。

它由活细胞分泌，进入到血清、唾液、尿液、羊水等多种生物体液中，进而影响邻近或远处的细胞。

图. 外泌体作为一种小囊泡，参与细胞间的通讯。

图片来自：Graça Raposo.Extracellular vesicles: Exosomes, microvesicles, and   friends.J Cell Biol. 2013 Feb 18; 200(4): 373–383

胎牛血清是常用的细胞培养基添加成分，它富含多种营养，满足细胞粘附、生长、增殖、解毒等需求。胎牛血清中也含有外泌体，并可能对所培养细胞具有一定作用。

2020年，有文献报道了胎牛血清外泌体对成骨细胞的增殖起促进作用，则确证了血清中的外泌体确实在细胞培养中发挥一定的作用。（文献1）

该实验的研究设计如下：

一、外泌体的提取和确证

取15 mL胎牛血清，通过超速离心100000xg获得外泌体，0.22μm过滤清洗后，将外泌体溶于100μlPBS中。并进行透射电子显微镜观察，以及后期WB检测标志蛋白确证。

二、细胞培养

小鼠胚胎成骨前体细胞MC3T3-E1细胞，前期用含10%胎牛血清的α-MEM培养液培养，传代。选取状态良好的第3代细胞用于后续实验。

三、细胞分组培养

对照组：胎牛血清（不含外泌体）+ α-MEM

外泌体组：在以上基础上另加入10 mg/L胎牛血清外泌体。

四、细胞检测

用CCK-8检测细胞增殖，WB检测细胞骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白。

结果显示，24h后，外泌体组细胞增殖明显高于对照组。同时，促进成骨的蛋白因子，如骨形态发生蛋白2和骨桥蛋白的表达水平明显增高。

作者指出：胎牛血清外泌体对成骨细胞的增殖起到促进作用，可为临床治疗骨破坏提供新思路。同时，国外的研究表明，使用祛除外泌体的胎牛血清培养细胞，大多数细胞的生长速率均降低，提示血清中的外泌体在细胞生长及存活方面起到一定的作用（文献2）。

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