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胎牛血清中的外泌体参与细胞的增殖

2021-01-27 16:06来源:威正翔禹|缔一生物

外泌体(Exosome)是近年研究的热点,它是新发现的一种细胞通讯的形式。外形上看,它是30-150nm的小囊泡,里面却携带着多种蛋白质、RNA和脂类等重要信息。


它由活细胞分泌,进入到血清、唾液、尿液、羊水等多种生物体液中,进而影响邻近或远处的细胞。

图. 外泌体作为一种小囊泡,参与细胞间的通讯。

图片来自:Graça Raposo.Extracellular vesicles: Exosomes, microvesicles, and   friends.J Cell Biol. 2013 Feb 18; 200(4): 373–383


胎牛血清是常用的细胞培养基添加成分,它富含多种营养,满足细胞粘附、生长、增殖、解毒等需求。胎牛血清中也含有外泌体,并可能对所培养细胞具有一定作用。

2020年,有文献报道了胎牛血清外泌体对成骨细胞的增殖起促进作用,则确证了血清中的外泌体确实在细胞培养中发挥一定的作用。(文献1)

该实验的研究设计如下:

一、外泌体的提取和确证

取15 mL胎牛血清,通过超速离心100000xg获得外泌体,0.22μm过滤清洗后,将外泌体溶于100μlPBS中。并进行透射电子显微镜观察,以及后期WB检测标志蛋白确证。

二、细胞培养

小鼠胚胎成骨前体细胞MC3T3-E1细胞,前期用含10%胎牛血清的α-MEM培养液培养,传代。选取状态良好的第3代细胞用于后续实验。

三、细胞分组培养

对照组:胎牛血清(不含外泌体)+ α-MEM

外泌体组:在以上基础上另加入10 mg/L胎牛血清外泌体。

四、细胞检测

用CCK-8检测细胞增殖,WB检测细胞骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白。

结果显示,24h后,外泌体组细胞增殖明显高于对照组。同时,促进成骨的蛋白因子,如骨形态发生蛋白2和骨桥蛋白的表达水平明显增高。

作者指出:胎牛血清外泌体对成骨细胞的增殖起到促进作用,可为临床治疗骨破坏提供新思路。同时,国外的研究表明,使用祛除外泌体的胎牛血清培养细胞,大多数细胞的生长速率均降低,提示血清中的外泌体在细胞生长及存活方面起到一定的作用(文献2)。


明星产品:Ausbian®特级胎牛血清

Ausbian®特级胎牛血清被各大科研院所、高校重点实验室及药厂广泛使用,多年来持续稳定供应细胞典藏等重大项目。

产品描述:

1. 内毒素含量极低(≤3EU/ml)(国际规定:特级胎牛血清<10EU/ml)。

2. 极利于细胞的生长与传代,适合各类细胞培养。

3. 每个批号血清均具有完整的检验报告。

4. 七次无菌过滤,最后三次为0.1μm无菌过滤处理。

5. 进行细菌、真菌、支原体、病毒及病毒抗体检测,符合国际动物协会要求。

6. 每批次产量为1500瓶-2500瓶,保证大多数项目两年不需换批次,细胞试验数据稳定。