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血清灭活之争？一篇答疑解惑！血清使用小技巧（二）

2021-09-23 11:08来源：威正翔禹|缔一生物

关于血清灭活的问题由来已久。很多同学找到我们，询问血清到底要不要灭活、如何灭活的问题。今天，就在这里跟大家好好唠唠，关于血清灭活的那些事。


一、血清灭活指的是什么？


一般情况下，血清的灭活就是将解冻后的血清（还不知道血清该怎样解冻？快来戳戳这里有详细讲解：血清使用小技巧 | 如何保证血清活性？解冻和储存方法很重要！），通过水浴加热的方式来处理，达到灭活补体的目的，温度和时间控制在如下范围：


56℃加热30分钟

或

40℃加热20分钟


因此，买到手的血清究竟要不要灭活，主要考虑血清中的补体对于细胞培养以及后续实验是否产生影响。下面就来简单讲讲，补体与细胞培养的关系。



二、补体对细胞培养的影响？


补体是一种血清蛋白质，存在于人和脊椎动物血清及组织液中，不耐热，可组成庞大的补体系统，可介导免疫应答和炎症反应。激活的补体参与溶解细胞过程，刺激平滑肌收缩、细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。

因此，如果你的实验涉及以下这些情况时，建议去除血清可能带来的补体系统的干扰。


1

免疫学研究

2

诱导胚胎干细胞分化

3

利用昆虫细胞研究病毒感染

4

培养平滑肌细胞

5

其他补体参与的细胞培养过程


血清的**工作温度一般是在37℃左右，所以热灭火对于血清而言，也是一种不小的伤害，会导致一些营养成分流失，进而影响细胞状态。


那么，市面上的血清都含有补体吗？都需要进行热灭活吗？随着研究的深入，网上也有一些人表示，胎牛血清无需热灭活，这究竟是真是假？接下来就给大家揭示其中奥秘。



三、血清灭活疑云？


首先我们要明晰一点，按照牛发育情况，大体上，血清可以分为胎牛血清、新生牛血清、小牛血清和成牛血清。

其中，正规的胎牛血清，要求对5-8月胎龄（一般牛在10个月左右足月，后自然分娩）的胎牛采用心脏穿刺的方法采血，随后进行其他制备步骤，得到胎牛血清。因此：


靠谱的胎牛血清

没有形成一个完整的补体系统，不会真正地干预免疫！


所以，网传的正规胎牛血清无需热灭活的说法，是正确的，正常使用即可。



四、特殊情况


但有一点需要注意，如果你的实验涉及到一些其他特殊的神秘活性物质，必须要灭活，根据血清厂家多年来总结的经验，常规解冻后，40℃水浴加热20分钟即可，能够**程度地保留营养成分。


今天的血清使用小技巧的分享到这里就结束了，希望能给各位老师同学带来一点点帮助。



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