细胞培养中“低调的高手”——马血清

说起细胞培养用的血清，大多数人都会想到胎牛血清、新生牛血清，对于马血清却知之甚少。今天就给大家介绍一下血清中“低调的高手”——马血清。

一、马血清作用

细胞培养级的马血清，经过多次过滤，去除了许多大分子蛋白，但保留了血清中促细胞生长的活性因子，表现出与胎牛血清和牛血清的类似的特性，因而能用于细胞培养。

马血清可以刺激成纤维细胞分化，以及细胞外基质 (ECM) 、细胞因子的合成。另外培养神经细胞和心肌细胞、诱导生成树突状细胞等实验均可用马血清替代胎牛血清。

因此，马血清通常适用于那些研究有丝分裂后，细胞关于生长因子和激素等问题的实验。或许，我们可以这样说，从现有研究来看，马血清更适合用来研究特定种类细胞的分化。

实际实验应用方面：马血清已被用作脑皮质神经元-胶质细胞培养的一种必添加物；大鼠的 PC12 细胞，在培养过程中，也需要在基础培养基中添加马血清作为补充剂。

1. 马血清可用于细胞培养和干细胞的诱导分化，例如：

（1）RPMI-1640培养液加马血清培养脐带血单个核细胞。

（参考文献：李春莉, 王建伟, 姜蓉, et al. 人参总皂苷诱导红系血细胞增殖的信号转导[J]. 中国组织工程研究, 2009(23):4568-4572.）

（2）原代培养神经细胞。有人用含10%马血清的DMEM，分离培养BALB/c小鼠原代脑神经细胞。发现和添加2%神经细胞生长剂B27的Neurobasal培养基相比，含10%马血清的DMEM培养基更节省成本，方便廉价。

（参考文献：李丹, 吕耀中, 王微,等. 两种培养基分离培养BALB/c小鼠原代神经细胞方法的比较[C]// 中国北方实验动物科技年会. 辽宁省实验动物学会, 2015.）

（3）诱导脂肪干细胞向成肌细胞分化

（文献来源：刘杰,傅强.马血清在脂肪干细胞成肌诱导中的作用[J].中国组织工程研究, 15(14)）

（4）培养骨髓基质细胞。与胎牛血清相比，马血清对小鼠骨髓基质细胞的促增殖作用更好。

（文献来源：王改琴. 当归多糖对小鼠骨髓基质细胞黏附分子表达及其黏附功能的影响[D]. 学位论文.重庆医科大学, 2008.）

（5）添加20%马血清的L-DMEM培养液可诱导人骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞。

（文献来源：赵文静，陈亚洁，刘薇.人骨髓间充质干细胞分离培养及生物学特性研究.中国现代医学杂志.2006.16(18):2744-2747）

2. 马血清添加到微生物培养基中，可用于培养微生物，如：

（1）马血清添加到培养基中用于支原体的培养。在《兽药典》中，含马血清的支原体培养基被用于兽用疫苗的支原体检查。用KM2培养基(含马血清)还可培养猪肺炎支原体。

（文献来源：胡茂志 焦新安,等.猪肺炎霉形体单克隆抗体的制备与鉴定.《中国兽医科技》 2004年12期）

（2）马血清加入到固体和液体培养基中，可用于培养幽门螺杆菌。并且，和羊血清和牛血清比较，添加马血清的培养基更易于分装和保存。

（文献来源：刘琳娜, 丁士刚, 张静,等. 几种培养幽门螺杆菌方法的比较[J]. 胃肠病学, 2012, 017(004):240-241.）

3. 马血清及激素可共同诱导建立家兔股骨头缺血坏死的模型。

（文献来源：洪嵩, 张天宏. 非创伤性股骨头坏死模型的血液流变学及脂质代谢[C]// 2009**届贵州骨科论坛.）

二、注意事项

与胎牛血清一样，马血清在使用过程中也应注意几个原则：

1、避免反复冻融；

2、三步法解冻，及时分装；

3、配制好的完全培养基在4℃储存不要超过7天。

还有一个大家比较关心的问题，马血清是否需要灭活？

我们都知道，胎牛血清由于特殊的采血时间（5-8月胎龄），牛胚胎体内还没有形成完整的补体系统，因而不需要采用热灭活的手段对补体进行灭活。

而马血清，在没有特殊说明的情况下，一般采自成年马匹。作为脊椎动物，成年马也拥有完整的补体系统。

因而，如果所进行的实验中，涉及补体相关内容，建议大家在使用前对马血清进行热灭活，也可以直接购买商品化的灭活马血清。一些比较成功的实验案例中，所用到的马血清，也是经过热灭活的。

相关实验请参考：

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5111218/