如何祛除「普通细胞」的支原体污染？

　　支原体

　　污染

　　细胞污染支原体，是令细胞培养相关从业者十分头疼的问题。细胞感染了支原体又不愿丢弃怎么办?本系列内容分情况为大家解答。

　　01普通细胞支原体祛除

　　适用范围

　　对于费力扩增的细胞(如已转染，或经过体外刺激)，如果细胞中发现有支原体污染，但此细胞又不愿丢弃，希望继续培养，推荐使用MB公司生产的复合抗生素Zell Shield®。

　　02.Zell Shield®特点

　　·特点

　　高效广谱：Zell Shield®通过阻止支原体、真菌、霉菌、致命病菌增殖过程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。

　　安全：无细胞毒性，采用复合支原体敏感抗生素，对大多数细胞株无毒。

　　活性稳定：在细胞培养期间，Zell Shield®始终保持稳定的活性。

　　使用方便：Zell Shield®为无菌溶液，可直接加入培养基使用。

　　03.Zell Shield®使用方法

　　使用方法

　　(1)在每次使用Zell Shield®之前，细胞传代时，先使用厂家推荐的“悬浮冲洗法”处理好细胞，再使用加了Zell Shield®的培养基养细胞，能达到**的祛除支原体的效果。

　　(2)Zell Shield®常规为-18℃保存，建议使用前，先融化分装，仍旧-18℃避光保存，使用时按需融化配置。避免反复冻融。

　　(3)Zell Shield®按1:100浓度可直接加入培养基。例如：500ml培养基中添加5ml Zell Shield®，50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培养基使用。

　　什么是悬浮冲洗法

　　据研究表明，约98%的支原体存在于细胞表面和细胞间隙。细胞传代时，用干净的PBS反复悬浮冲洗，就能把70%以上的支原体冲下来。

　　支原体直径在180~350nm之间，远远小于细胞直径。通过低速离心，很容易将细胞和支原体分离，弃上清即可祛除大部分支原体。

　　简要步骤

　　消化细胞

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　　离心

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　　弃上清

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　　PBS清洗细胞

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　　低速离心弃上清

　　重复清洗3次

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　　加入含有Zell Shield®的

　　新鲜培养基

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