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支原体污染的细胞培养物能用于实验吗

2024-06-03 16:14

支原体污染的细胞培养物不能用于实验。以下是详细的解释和归纳:

支原体污染对细胞的影响:

支原体污染会导致细胞生长缓慢、形态改变,甚至引起细胞死亡。

支原体可以大量消耗培养基中的营养和细胞代谢的基础成分,如核酸前体、氨基酸、维生素、脂质、胆固醇等,导致细胞增殖缓慢及各种代谢、功能紊乱甚至丧失。

支原体还会吸附在细胞表面,破坏细胞膜的完整性,更有少数类型支原体可进入细胞内,如发酵支原体、生殖支原体和肺炎支原体。

对实验结果的影响:

被支原体污染的细胞无法用于得出准确的实验数据。

支原体污染会干扰细胞的代谢过程,影响细胞的功能和表达,从而干扰实验结果的分析和解读。

支原体还可能作为外源性因素,对实验结果产生潜在的干扰,使研究者难以区分细胞的内在变化与外界因素的影响。

检测支原体污染:

支原体污染在普通光学显微镜下难以被发现,细胞被污染早期不会表现出明显的症状

目前常用的检测方法有:DNA染色法、支原体培养法、PCR法(包括凝胶电泳和荧光定量)、化学发光法等。但需要注意的是,这些方法虽然可靠,但实验周期可能较长。

综上所述,支原体污染的细胞培养物不能用于实验,因为支原体污染会严重影响细胞的生长、代谢和功能,进而干扰实验结果的准确性和可靠性。因此,在细胞培养过程中,需要采取一系列预防措施来避免支原体污染,如加强实验室的清洁和消毒工作、选择质量可靠的培养基和血清等培养材料、实验操作人员严格遵守实验室规范等。如果怀疑细胞培养物被支原体污染,应立即进行检测并采取相应的处理措施。

对于费力扩增的细胞(如已转染,或经过体外刺激),如果细胞中发现有支原体污染,但此细胞又不愿丢弃,希望继续培养,推荐使用MB公司生产的复合抗生素Zell Shield®

细胞祛除支原体试剂Zell Shield使用方法:

(1)在每次使用Zell Shield®之前,细胞传代时,先使用厂家推荐的悬浮冲洗法处理好细胞,再使用加了Zell Shield®的培养基养细胞,能达到更好的祛除支原体的效果(悬浮冲洗法的详细步骤,见下文)。

(2Zell Shield®常规为-18℃保存,建议使用前,先融化分装,仍旧-18℃避光保存,使用时按需融化配制。避免反复冻融。

(3Zell Shield®1:100浓度可直接加入培养基。例如:500ml培养基中添加5ml Zell Shield®50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培养基使用。


北京缔一生物科技有限公司国内总代Ausbian品牌,德国Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。细胞培养实验使用的Ausbian澳洲进口特级胎牛血清,新生牛血清,干细胞培养基,马血清,德国MB支原体检测/祛除试剂盒,DNA污染祛除试剂,支原体PCR/qPCR定量试盒等产品。欢迎访问缔一生物官网:www.dyshengwu.com。联系电话:4006661688。