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核酸污染处理的常用方法有哪些

2024-06-11 16:58

核酸污染处理的常用方法主要包括以下几个方面:

一、污染区域的初步处理

标本污染生物安全柜的操作台:

立即用吸水纸覆盖污染区域。

使用0.55%含氯消毒剂进行喷洒消毒。消毒液需要现用现配,并在24小时内使用。

标本倾覆造成实验室污染:

保持实验室空间密闭,避免污染物扩散。

立即使用润湿有0.55%含氯消毒剂的毛巾覆盖污染区。

必要时(如大量溢撒时),可采用过氧乙酸加热熏蒸实验室(剂量为2g/m³,熏蒸过夜)或使用20g/L过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾(用量8ml/m³,作用1-2小时)。

二、污染物的清理与去除

清理污染物:

严格遵循活病毒生物安全操作要求。

采用压力蒸汽灭菌处理,并进行实验室换气等,防止次生危害。

使用专门的去除剂:

核酸实验室污染后难以清除,可使用专门的实验室污染去除仪去除实验室核酸污染。

对于生物安全柜内部和移液器等设备,可以先用酒精擦拭,再用PCR Clean DNA污染祛除喷雾剂,预防DNARNA交叉污染。

三、污染的防控与预防

严格实验室功能分区:

实验室应设置试剂储存和准备区、样本制备区、扩增和产物分析区等,各区域在物理空间上应当是完全相互独立的。

监控与检测:

每次检测过程中,应设置阴性对照。

每天对实验室内空气进行采样监测,范围至少应包括样本制备区和扩增产物分析区。

定期对实验室台面、门把手、仪器设备表面进行取样监测。

加强实验人员的培训:

确保实验人员了解并遵循正确的操作流程,减少人为污染的风险。

四、污染清除的实验验证

放置开盖装有PBS的离心管:

在试剂准备区的洁净工作台面、样本制备区的生物安全柜内部、核酸提取仪内部和扩增区台面分别放置开盖装有PBS的离心管,过夜,以检测是否存在污染。

对实验台面、生物安全柜台面和移液器进行取样:

使用采样拭子蘸取PBS后,对实验台面、生物安全柜台面和移液器的内外表面进行反复擦拭,然后放入PBS中进行洗脱,以检测污染情况。

综上所述,核酸污染的处理方法需要综合考虑污染的类型、程度和范围,采取合适的措施进行清理和去除,同时加强实验室的监控和检测,确保实验室环境的清洁和安全。