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支原体qPCR检测试剂盒 探针法

2024-07-01 16:20
文章附图

支原体检测试剂盒(探针法)是一种用于确定如细胞库、病毒种子、临床治疗用途的细胞和生物制品中是否存在支原体污染的检测工具。以下是关于该试剂盒的详细信息:

一、产品概述

品牌德国Minerva-Biolabs®
供应商:北京缔一生物/上海威正翔禹

产品名称:qPCR Kit(经典法) Venor®Gem qEP

型号:11-9025、11-9100、11-9250

价格:根据规格不同,价格有所差异

保质期:1年6个月

保存条件:2~8℃保存至少12个月。复溶后-18℃以下保存。

qPCR Kit  (经典法).jpg

二、支原体qPCR检测试剂盒特点

1.内控对照为独立包装,遵循欧洲药典和日本药典操作流程。

2.高特异性,一次检测即可涵盖所有常见易感染细胞的支原体物种(包括欧洲药典规定的9种支原体)。与细菌和真核DNA无交叉反应。

3.高灵敏度,最低检测限可达到≤10CFU/ml。

4.相应配套的支原体基因组DNA和细菌基因组DNA,便于特异性验证。

5.有相应配套的支原体绝对定量标准品,便于最后定量检测。


三、操作步骤

1步:样本处理

a.细胞培养上清

b. 生物药或需遵循药典的样本

说明:①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。

    ②细胞培养物样本含丰富的DNA酶,在低温下也能降解支原DNA,影响检测灵敏度。

建议:样本做DNA抽提处理,实现最高灵敏度。

推荐:德国MB公司生产的专用支原体DNA提取试剂盒

Venor® Gem Sample Preparation Kit

DNA抽提试剂盒已经过广泛验证。


2步:试剂制备

a.冻干粉溶解

b. 反应体系制备

b1) 样品为细胞上清筛查——反应体系制备

b2) 样品为生物药——反应体系制备

3步:启动荧光定量PCR仪

4步:结果判别

FAM通道:检测支原体荧光信号。HEX通道:检测内控对照荧光信号。

支原体DNA和内控DNA存在信号的竞争性抑制。

支原体DNA越多,FAM通道信号越高,检测内控对照的HEX通道信号越低。

定量需基于Ct值和DNA标准曲线。

Ct<40为阳性结果。Ct≥40为阴性结果。

示意图:


四、使用建议

本产品仅作科研用途。

建议使用德国Miverva Biolabs公司的支原体DNA提取试剂盒,通过对DNA的提取,来提高检测的准确率。

操作时应遵循说明书,规范操作,注意安全和健康。

支原体qPCR检测试剂盒(探针法)为科研人员提供了一种高效、准确、可靠的支原体检测方法,有助于在科研工作中及时发现和处理支原体污染,提高科研效率。