细胞培养新手必读！

　　在进行科学研究时，细胞培养作为一项基本的研究方法，经常会被用到。可细胞培养到底是什么样的过程呢？下面是我们的实验员培养细胞的心得体会：一养细胞深似海，从此自由是路人。开始养细胞之前就要做好随时照顾它的心理准备，三天打鱼两天晒网不仅无法养出状态绝佳的细胞，还有可能让娇贵的细胞宝宝全军覆没，那么，怎么才能培养出符合条件的细胞呢？

　　1、选择正确的培养基

　　在养细胞之前，就要了解，你所养细胞的来源以及种类和名称，查阅一定量的文献，确定所需培养液种类以及是否需要添加特殊成分，常用的细胞培养液有DMEM、RPMI1640、F12等等，一些常见的细胞基本可以使用这几种培养基中的一种来培养，有的需要加入一定其他成分，这需要根据不同的细胞类型，查ATCC细胞库或者查文献，才能找到所需**培养液。选择正确的培养液是养好细胞的**步。

　　2、了解细胞的生长习性

　　不同的细胞生长习性不同。如成纤维细胞是贴壁生长，有一定的密度依赖性，密度小可能会出现不增殖，状态差的情况，接种密度大时则需要隔天传代，频繁传代则影响细胞状态；再如RPMI-8226人多发性骨髓瘤细胞，是悬浮生长的，传代需离心弃去上清即可。总之，了解细胞生长习性，再加上正确的计数，才能掌握好传代的密度。

　　3、选择优质的血清

　　血清中含有细胞生长所必须的生长因子，作为哺乳动物细胞培养的附加物，血清的添加是十分重要的，因此，选择优质的血清，是细胞养殖成功与否的关键！

　　4、及时传代和更换培养液

　　在细胞增殖到一定的密度后，要及时传代，根据细胞的生长速度和密度，及时更换培养液。更换过勤，浪费培养液，更换不够及时，则细胞状态转差，一般需隔天更换培养液，具体可根据所养细胞种类予以调整。

　　5、绝对的无菌意识

　　前面林林总总全部都注意好了，如果无菌意识差，细胞中混入了微生物，则千里之堤溃于蚁穴，细菌的生长速度和破坏力，将迅速占领培养皿，破坏细胞结构，有些初学者会在培养液中加入1%的双抗，但是，无菌意识不强，双抗亦无法拯救你的细胞！

　　6、倾心的呵护，频繁的观察

　　做到以上几点，就可以开始养你的细胞了，但是再次重申细胞娇弱，在养细胞的过程中，难免会出现一些意想不到的问题，要想成功养好细胞，时时惦记它 ，频繁地观察，初期一天观察2次都不足为过，出现任何预料外的情况，及时处理，才能保障收获一盘“漂亮”的细胞。

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