胎牛血清中的病毒检查

胎牛血清中的病毒检查

胎牛血清是实验室常用的天然培养基。它富含各种营养，但也容易因母牛存在的病毒感染而携带有病毒，从而给细胞培养带来潜在的干扰。因此，不但要从源头上保证怀孕的母牛是健康的，没有各种传染病（包括没有疯牛病疫情），屠宰场需在政府注册过，而且在胎牛血清的质检中，也要进行各种病毒检查，以保证胎牛血清的品质。而胎牛血清的批号，则保证了每个批次的生产都是可以追溯的。

在美国，胎牛血清的病毒检查遵循着9 CFR 113.52 、9 CFR 113.53联邦法令，并以兽药委员会（CVMP）关于免疫性兽药生产中应用牛血清的指南文件（EMEA/CVMP/743/00-Rev.2）、**药委员会（CPMP）关于生物药生产中牛血清应用指南的文件（EMEA/CPMP/BWP/1793/02）为参考，并在美国药典（USP）中有所描述。而我国在药典中目前只有有关新生牛血清的质检规定，还没有胎牛血清的内容。

在USP提到病毒检查中，建议使用两种或两种以上的细胞系作为检测细胞，其中一种细胞系应为牛源。检测时，添加15%的待测牛血清培养细胞至少21天，期间细胞至少传代两次。之后观察是否存在病毒的扩增。如用显微镜观察是否存在细胞病变效应（例如由牛鼻支气管炎病毒导致）、细胞染色和镜下包涵体检查、血吸附检查（(牛副流感3型病毒），并在此基础上进行针对如下病毒的特异性的免疫荧光抗体检查：

Ø牛病毒性腹泻病毒（BVDV）

Ø牛细小病毒

Ø牛腺病毒

Ø牛兰舌病毒

Ø牛呼吸道合胞病毒

Ø呼肠弧病毒

Ø狂犬病病毒

在其他牛血清的应用中，可能还需要检测一些其他的病毒。如：

牛赤羽病，牛疱疹病毒1（BHV-1）、副流感-3病毒（PI-3）、牛白血病、牛轮状病毒、牛圆环病毒、牛多瘤病毒、冠状病毒、牛环曲病毒、牛肠道病毒、牛星状病毒、口蹄疫病毒（FMDV）、牛瘟病毒。

总之，确定牛血清没有病毒感染，无论对于细胞培养，还是疫苗生产，都具有非常重要的意义。